Специализированное научно-практическое издания для ветеринарных врачей и студентов ветеринарных ВУЗов.

Автор: Мануэла Гиззарелли, Серена Калабро, Алессандро Вастоло, Джузеппе Молинаро, Инес Балестрино и Моника Изабелла Кутриньелли. Кафедра ветеринарной медицины и животноводства, Неаполитанский университет им. Федерико II, Неаполь, Италия.

В последние годы владельцы домашних животных стали больше интересоваться ингредиентами и качеством кормов для домашних животных, и несколько исследований показали, что правильное использование корма может повлиять на состояние здоровья питомцев. Некоторые авторы указывают, что коммерческие диеты без злаков или с использованием нетрадиционных источников белка и крахмала могут вызывать снижение уровня таурина как в цельной крови, так и в плазме. Тем не менее конкретный механизм, с помощью которого факторы питания определяют это снижение, до конца не ясен.
Цель данного исследования состояла в том, чтобы в течение среднесрочного периода (5 недель) оценить эффективность трех диет: двух беззерновых (GF1 и GF2) в сравнении с одной на основе злаков (CB), составленных с различными источниками углеводов. Их количество может повлиять на профиль крови и биохимические параметры, особенно в отношении уровня таурина у здоровых собак. Авторы предположили, что различные источники углеводов могут влиять на состояние здоровья взрослых собак.

Материалы и методы

Животные и диеты

Двойное слепое исследование проводилось в частном питомнике, расположенном в провинции Неаполь (Италия). В начале исследования ветеринарный врач провел клинический осмотр 50 взрослых собак, а также гематологические, биохимические и паразитологические исследования²⁰ для исключения животных с признаками патологий. Впоследствии было набрано 30 взрослых кастрированных полукровок (возраст 4 ± 1,20 года, вес 20,79 ± 6,38 кг, BCS – 3,96 ± 0,95 по пятибалльной шкале). Каждая собака содержалась в индивидуальном боксе площадью 8 м² (2 × 4), состоящем из закрытой части для отдыха (2 × 2) и открытой общей площадки для выгула на пять соседних боксов. Перед началом исследования и в первые дни каждого адаптационного периода всех собак подвергали копромикроскопическим анализам на кишечные нематоды (Trichuris, Toxocara, Toxascaris, Ancylostomidae), сердечно-легочные нематоды (Angiostrongylus и Capillaria), цестоды (Dipylidium и другие Taeniidae) и простейшие (Giardia и Cystoisospora). Если результаты этих анализов оказывались положительными, животных немедленно начинали лечить необходимыми препаратами.
После регистрации собак разделили на три отдельные группы, однородные по полу, возрасту, весу и оценке состояния тела (BCS). Для эксперимента были выбраны три коммерческих сухих корма (производство Farmina Pet Foods, Нола, Италия) с названиями GF1, GF2 и CB соответственно, которые вводились экспериментальным группам поочередно по схеме латинского квадрата (3 рациона × 3 группы). Каждый экспериментальный период длился в течение 50 дней (15 дней адаптации и 35 дней испытаний), каждая диета применялась в соотношении 110 ккал/кг^0,75 метаболизируемой энергии⁶.

Рационы характеризовались сходной энергетической плотностью (3995 ± 4,73 ккал/кг), состояли в основном из одного и того же источника белка (курица), но из разных источников углеводов (зерновые злаки в сравнении с бобовыми или клубнями).

Ингредиенты каждой диеты были следующими:

Контрольная диета CTR: рис, свекольный жом, мясо птицы и индейки, жиры и масла, минеральные вещества;
Диета GF1: курица без костей, обезвоженный куриный белок, сладкий картофель, куриный жир, сушеные яйца, сельдь, обезвоженный белок сельди, рыбий жир (из сельди), гороховая клетчатка и сушеная морковь;
Диета GF2: курица без костей, обезвоженный куриный белок, гороховый крахмал, куриный жир, сушеная тыква, сушеные яйца, сельдь, обезвоженный белок сельди, рыбий жир (из сельди), гороховая клетчатка и сушеная морковь;
Диета CB: курица без костей, обезвоженный куриный белок, спельта, овес, куриный жир, сушеные яйца, сельдь, обезвоженный белок сельди, сушеный жом свеклы, рыбий жир (из сельди) и сушеная морковь.

Химический состав рациона и аминокислотный профиль. Аликвоту 500 г для каждой диеты анализировали с помощью спектроскопии в ближней инфракрасной области (NIRS DS 2005F, FOSS, Хиллерёд, Дания), результаты исследований использовали для определения химического состава пищевых продуктов^21,22. Общее количество пищевых волокон, а также доли фракций (растворимой и нерастворимой) определяли согласно методике, разработанной в исследованиях для определения содержания нерастворимых пищевых волокон (IDF), растворимых пищевых волокон (SDF) и общего количества пищевых волокон (TDF) в продуктах питания с использованием комбинации ферментативных и гравиметрических процедур^23,24. Рацион также анализировали для определения его аминокислотного профиля с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии (Agilent Technologies 1290, Калифорния, США)²⁵.

Клинический осмотр, проверка веса и отбор проб

В начале каждого экспериментального периода собак взвешивали и оценивали их состояние тела (BCS). В начале исследования и в конце каждой фазы питания у каждой собаки после предварительного голодания (натощак) осуществляли забор ~10 мл крови для оценки гематологического и биохимического профилей, определяли уровень таурина в плазме и в цельной крови. Каждый образец крови анализировали с помощью импедансного устройства для проведения инструментального подсчета (HeCo 5 Vet C, Real Time Diagnostic Systems, Сан-Джованни-Вальдарно, Италия) после медленного и постоянного перемешивания в течение 20 мин. В конце каждого этапа у пяти собак из каждой группы брали образцы крови для определения уровня таурина в цельной крови. Концентрацию таурина в плазме определяли с помощью хроматографии с обращенной фазой на тройном квадрупольном масс-спектрометре (LC-MS/MS Sciex API 4000 QTRAP плюс Agilent HPLC и автоматический пробоотборник CTC PAL, Санта-Клара, Калифорния, США)²⁶.

Статистический анализ

Влияние диет оценивали с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Тест Тьюки-HSD использовался в тех случаях, когда наблюдались существенные различия. Для сравнения каждой диеты с контрольной (CTR) использовали критерий Даннета, позволяющий проводить множественные сравнения. Все статистические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения JMP 14 (SAS Institute, Северная Каролина, США).

Полученные результаты

В табл. 1 показан химический состав рационов, использовавшихся во время исследования. Все статистические анализы были направлены на сравнение рационов. GF1 показал самые высокие значения белка и золы (P < 0,01 и P < 0,05 соответственно). Энергетические питательные вещества (белки, углеводы и липиды) рационов GF1, GF2 и CB были равными. Кроме того, три протестированные диеты показали более высокие уровни белка и энергии, чем контрольная диета CTR с повышенным содержанием углеводов. Общее содержание пищевых волокон (TDF) в GF1 было значительно ниже (P < 0,05), чем в CB (76,78 против 83,73 против 94,30 г/кг для GF1, GF2 и CB соответственно). Более того, во всех диетах растворимая клетчатка встречалась чаще, чем нерастворимая (60,65; 58,61 и 63,15% TDF соответственно).

Таблица 1. Химический состав рациона (г/кг в чистом виде) и энергетическая ценность (ME ккал/кг в чистом виде).

*Химический состав контрольной диеты указан на этикетке; GF1 – беззерновой рацион 1; GF2 – беззерновой рацион 2; CB – зерновая диета; заглавные буквы вдоль строки обозначают различия для Р < 0,01 и Р < 0,001; строчными буквами указаны различия для P < 0,05; RMSE – среднеквадратическая ошибка. Статистическое сравнение проводилось между рационами GF1, GF2 и CB. *ME, рассчитанный в соответствии с прогностическим уравнением, указанным NRC 2006⁶

Во всех трех рационах преобладающими аминокислотами были глутаминовая, аспарагиновая, глицин, аланин, аргинин и лизин (табл. 2). Концентрация всех аминокислот, по-видимому, отражает содержание белка в рационе.

Таблица 2. Аминокислотный профиль рационов, использовавшихся во время исследования.

*Пищевая ценность и рекомендации FEDIAF-2020, основанные на потребности в обменной энергии 110 ккал МЕ/кг^0,75; GF1 – беззерновой рацион 1; GF2 – беззерновой рацион 2; CB – диета на основе злаков; NA – неприменимо.

Все зарегистрированные значения результатов анализов крови попадают в относительный физиологический диапазон для данного вида животных. Дисперсионный анализ не выявил различий между рационами, однако тест Даннета показал значительные различия (P < 0,01) показателей MCHC (англ. mean corpuscular hemoglobin concentration) между контрольной CTR и каждой тестируемой диетой, что привело к снижению на 1 г/дл по сравнению с рационами GF1, GF2 и CB. Кроме того, значения тромбоцитов оказались существенно выше (P < 0,05) для CTR по сравнению с CB (328 против 287 10³/мкл соответственно).
Диетотерапия влияла лишь на некоторые биохимические параметры. Дисперсионный анализ показал, что у собак были отмечены весьма высокие (P < 0,01) значения АСТ, фруктозамина, липазы и триглицеридов при использовании рациона CTR. Тест Даннета более четко выявил различия между CTR и каждой тестируемой диетой, в частности уровень триглицеридов был примерно вдвое выше при назначении диеты CTR.

Все параметры минерального профиля находились в физиологических пределах для здоровых собак. Результаты обоих статистических анализов показывали существенные различия в содержании калия, фосфора и магния, показатели которых всегда были значительно выше в CTR, чем в рационах GF1, GF2 и CB.

Обсуждение

Все рационы показали характеристики, способные удовлетворить потребность в питательных веществах взрослых собак⁶, находящихся в вольерах. В частности, количество сырого протеина, общего жира и метаболизируемой энергии соответствует уровням, рекомендованным FEDIAF-2020²⁷. За весь период исследования не было зафиксировано отказов от корма, вероятно, из-за высокой вкусовой привлекательности всех рационов. Учитывая, что существенных различий по весу и в балльной оценке упитанности животных не наблюдалось (21,59 ± 5,70 кг; BCS 3,97 ± 0,81 по пятибалльной шкале), можно утверждать, что суточная норма корма для каждой собаки была правильно рассчитана во всех группах²⁸.
Количество незаменимых аминокислот (г/1000 ккал) в трех тестируемых рационах примерно вдвое превышало минимальные уровни, рекомендованные FEDIAF²⁷ для взрослой собаки, у которой потребность в метаболической энергии составляет 110 ккал/кг^0,75. Все экспериментальные рационы способны полностью удовлетворить вышеупомянутые потребности в питательных веществах даже для собак с более низкой потребностью в энергии (95 ккал/кг^0,75) с учетом кажущейся усвояемости на уровне 70%²⁹.

Существенных изменений в гематологических профилях в рамках рационов не наблюдалось. У всех собак показатели анализов крови находились в пределах референтных значений. Единственные исключения были зарегистрированы для двух показателей: MCHC (CTR против GF1, GF2 и CB, P < 0,01) и количество тромбоцитов (CTR против CB, P < 0,05). Однако авторы отметили, что на основании проведенного исследования невозможно было установить, являются ли эти результаты случайными или некой тенденцией. Важно подчеркнуть, что даже при существенных различиях значения MCHC и количества тромбоцитов были в пределах референсных интервалов. Принимая во внимание отсутствие клинических признаков или клинико-патологических изменений, а также отрицательные результаты в отношении в основном трансмиссивных заболеваний собак, представляется вероятным, что указанные результаты были вызваны какой-либо патологической причиной. Имеется очень мало данных о влиянии диеты на гематологические параметры^30,31, позволяющих прояснить различия, которые были получены в результате данного исследования. Однако интересно отметить, что в исследовании Anturaniemi et al.³¹ более высокое количество эритроцитов и повышенный уровень гемоглобина наблюдались у собак, которые получали рацион с высоким содержанием белка, по сравнению с животными, которым давали корма с низким содержанием белка. В настоящем исследовании повышенные значения MCHC у собак, получавших корм с большим, чем в контрольном рационе, содержанием белка, могут подтверждать ту же тенденцию с учетом того, что белок рациона может играть роль в поддержании соответствующих индексов эритроцитов³². Напрашивается вывод о необходимости проведения дальнейших исследований для более точного определения, какой диетический фактор несет ответственность.

Биохимический профиль у всех собак также находился в физиологическим диапазоне, характерном для данного вида животных. Различия, связанные с фруктозамином, липазой и триглицеридами, полученные с помощью теста Даннета, по-видимому, указывали на влияние диеты на метаболизм углеводов и липидов. В частности, изменение этих параметров, наблюдаемое при использовании диет GF1, GF2 и CB, может быть связано с различными пропорциями углеводов, липидов и белков в этих рационах по сравнению с контролем CTR. Источники углеводов, которые применялись при составлении контрольного рациона, показали более высокое содержание безазотистых экстрактивных веществ, чем в других рационах (NFE: 42,3 против 30,83; 34,83 и 34,60% без изменений для диет CTR, GF1, GF2 и CB соответственно), в то время как содержание жиров и белка в контрольной диете было значительно ниже, чем в экспериментальной группе. Снижение АСТ, наблюдаемое при использовании всех диет (по сравнению с контрольной), может свидетельствовать о более низком печеночном стрессе. Аспартатаминотрансфераза (АСТ) – это фермент, который содержится в основном в печени и сердце, а также в более низких концентрациях – в почках и мышцах. Низкий уровень АСТ свидетельствует о хорошем здоровье, тогда как при повреждении клеток печени или мышц фермент высвобождается и его содержание в крови увеличивается. Повышенный же уровень АСТ в сыворотке крови в сочетании с другими изменениями гематологических параметров (например, более низкими значениями АЛТ) и прочими клиническими признаками можно рассматривать как показатель повреждения или заболевания печени³⁶. В данном исследовании клинических признаков поражения печени не наблюдалось – все показатели можно было оценивать как нормальные физиологические. Тем не менее на повышенную метаболическую активность в печени могут указывать более высокие значения АСТ, зарегистрированные в случаях применения диет CTR и GF1³⁷.

Другой важный аспект, возможно, касался используемых источников углеводов. В то время как диета CTR была составлена из риса (источник крахмала) и свекольного жома, которые в основном содержат нерастворимую клетчатку, в трех других диетах использовались гороховый крахмал, спельта и овес, характеризующиеся низким гликемическим индексом, а морковь, тыква и гороховое волокно добавлялись в качестве источников пищевых волокон^38,39. Данные ингредиенты гарантируют большее потребление растворимых пищевых волокон, способных модулировать постпрандиальную гликемическую реакцию. Более того, эти различные компоненты пищи способствуют поддержанию баланса сапрофитных бактериальных популяций толстого кишечника, так как здесь происходит его ферментация с образованием короткоцепочечных жирных кислот⁴⁰, в частности бутирата, считающегося основным источником энергии для эритроцитов и колоноцитов. Пищевые волокна считают фактором, способным изменять абсорбцию липидов, прямо или косвенно снижая реабсорбцию желчных кислот⁴¹. Снижение уровня триглицеридов, которое наблюдалось на диетах GF1, GF2 и CB, может быть связано с ограниченным всасыванием триглицеридов в тонком кишечнике^41,42. Снижение абсорбции липидов было подтверждено значительным уменьшением продукции панкреатической липазы. Действительно, в одной из публикаций (Stock-Damge et al.⁴³) было доказано, что добавление 5 г пшеничных отрубей в день в течение 4 недель в стандартный рацион для собак привело к значительному увеличению (P < 0,05) секреции поджелудочной железы и снижению (P < 0,05) концентрации липазы.

Повышенные концентрации калия, фосфора и магния в сыворотке, зарегистрированные у собак, получавших контрольную диету, могут быть связаны с увеличением концентрации фосфора в этой диете (12 против 8 мг/кг). С другой стороны, повышение уровня фосфора в сыворотке крови у собак, получавших рацион GF1, может быть связано с высокой степенью биодоступности этого элемента, полученного в основном из животных источников. Кроме того, рационы CTR и GF1 характеризовались более высоким соотношением Ca:P (1,50; 1,25; 1,12 и 1,12 – CTR; GF1; GF2 и рацион CB соответственно)⁶. Хотя статистически значимых различий не отмечалось, наблюдались повышенные значения обоих параметров по сравнению с исходными значениями 288,27 и 101 нмоль/л, зафиксированными при контрольном рационе. Еще одним интересным аспектом является то, что во всех случаях уровни таурина были выше оптимальных резервных уровней, указанных FEDIAF²⁷ (> 40 нмоль/л в плазме и > 200 нмоль/л в цельной крови) и исследователями Калифорнийского университета⁴⁴ (> 70 нмоль/мл в плазме и > 250 нмоль/мл в цельной крови), независимо от риска развития дилатационной кардиомиопатии у взрослых собак.

Данные публикаций о влиянии диеты на концентрацию таурина в крови и в сыворотке противоречивы^17,45,46. Отмечалось (Delaney et al.⁴⁵), что концентрация таурина в цельной крови была ниже у собак, которых кормили цельнозерновым рисом, рисовыми отрубями или ячменем. Снижения уровня аминокислот и таурина не наблюдалось в плазме крови у лабрадоров-ретриверов, получавших коммерческую беззерновую диету в течение 26 недель (Donadelli et al.¹⁷).

В данном исследовании, проведенном с участием здоровых собак, повышение уровня таурина в цельной крови и плазме наблюдалось через 5 недель применения трех диет. Контрольная диета (использовавшаяся до испытания) может быть определена как традиционная диета (включая зерно, рис и свекольный жом), в то время как три протестированных рациона имели особые питательные характеристики и углеводные ингредиенты: GF1 (беззерновой, со сладким картофелем, гороховой клетчаткой, сушеной морковью), GF2 (беззерновой с гороховым крахмалом, сушеной тыквой, гороховой клетчаткой, сушеной морковью) и СВ (зерновой, в том числе со спельтой, овсом, жомом сушеным, морковью сушеной).

Можно утверждать, что относительные пропорции питательных веществ в рационе (а не использование новых ингредиентов) способны влиять на уровень таурина. Действительно, для всех испытанных рационов характерно наличие высококачественных источников белка (дегидратированная и свежая курица, сельдь, яйца), а высокий уровень включения белка позволяет удовлетворить потребность в белке и аминокислотах и, как следствие, тауриновый статус.

Кроме того, относительно более низкая среднеквадратическая ошибка содержания таурина в цельной крови по сравнению с плазмой подтверждает предыдущее наблюдение⁴⁵ о большей стабильности концентрации таурина в цельной крови.

Вывод. Наши предварительные результаты показали, что лишь некоторые гематологические параметры были затронуты при назначении сбалансированного рациона здоровым собакам. Источники углеводов (крахмал и пищевые волокна) и соответствующий баланс между энергетическими питательными веществами (например, белком, жиром и крахмалом) могут изменять показатели липидного и углеводного обмена (АСТ, фруктозамин, липаза, триглицериды) и улучшать функцию печени.

Полная версия: Ссылка

Список литературы:

Wong PWC, Yu RWM, Ngai JTK. Companion animal ownership and human well-being in a metropolis—the case of Hong Kong. Int J Environ Res Public Health. (2019) 16:1729.
ASSALCO. REPORT ON THE FEEDING AND CARE OF PETS. Pets: Rights and Responsible Ownership. The Italian Perspective. ASSALCO (2019).
Vinassa M, Vergnano D, Valle E, Giribaldi M, Nery J, Prola L, et al. Profiling Italian cat and dog owners’ perceptions of pet food quality traits. BMC Vet Res. (2020) 16:131.
Pezzali GJ, Aldrich CG. Effect of ancient grains and grain-free carbohydrate sources on extrusion parameters and nutrient utilization by dogs. J Anim Sci. (2019) 97:3758-67.
Carciofi AC, Takakura FS, de-Oliveira LD, Teshima E, Jeremias JT, Brunetto MA, et al. Effects of six carbohydrate sources on dog diet digestibility and post-prandial glucose and insulin response. J Anim Physiol Anim Nutr. (2008) 92:326-36.
NRC. Nutrient Requirements of Dogs and Cats. Washington, DC: National Academy Press (2006).
Singh N. Pulses: an overview. J Food Sci Technol. (2017) 54:853– 7.
Hall C, Hillen C, Robinson JG. Composition, nutritional value, and health benefits of pulses. Cereal Chem. (2017) 94:11– 31.
Mansilla WD, Marinangeli CPF., Ekenstedt KJ, Larsen JA, Aldrich G, Columbus DA, et al. Special topic: the association between pulse ingredients and canine dilated cardiomyopathy: addressing the knowledge gaps before establishing causation. J Anim Sci. (2019) 97:983–97.
Food and Drug administration (FDA). Investigation into Potential Link between Certain Diets and Canine Dilated Cardiomyopathy. Available online at: Ссылка (accessed January 27, 2021).
Dukes-McEwan J, Borgarelli M, Tidholm A, Vollmar AC, Häggström J. Proposed guidelines for the diagnosis of canine idiopathic dilated cardiomyopathy. J Vet Cardiol. (2003) 5:7-19.
Petric AD, Tomsi ˇ c K. Diagnostic methods of cardiomyopathy in dogs - old ˇ and new perspectives and methods. Slov Vet Res. (2008) 45:5-14.
Adin DTC, De Francesco B, Keene S, Tou K, Meurs C, Atkins B, et al. Echocardiographic phenotype of canine dilated cardiomyopathy differs based on diet type. J Vet Card. (2019) 21:1–9.
Kaplan JL, Stern JA, Fascetti AJ, Larsen JA, Skolnik H, Peddle GD, et al. Correction: taurine deficiency and dilated cardiomyopathy in Golden Retrievers fed commercial diets. PLoS One. (2018) 13:1-19.
Freeman LM, Stern JA, Fries R, Adin DB, Rush JE. Diet-associated dilated cardiomyopathy in dogs: what do we know? J Am Vet Med Assoc. (2018) 253:1390–4.
Ontiveros ES, Whelchel BD, Yu J, Kaplan JL, Sharpe AN, Fousse SL, et al. Development of plasma and whole blood taurine reference ranges and identification of dietary features associated with taurine deficiency and dilated cardiomyopathy in Golden Retrievers: a prospective, observational study. PLoS One. (2020) 15:e0233206.
Donadelli RA, Pezzali GJ, Oba PM, Swanson KS, Coon C, Verney J, et al. Commercial grain-free diet does not decrease plasma amino acids and taurine status but increases bile acid excretion when fed to Labrador Retrievers. Transl Anim Sci. (2020) 4:1-12.
Pezzali JG, Acuff HL, Henry W, AlexanderC, Swanson KS, Aldrich CG. Effects of different carbohydrate sources on taurine status in healthy Beagle dogs. J Anim Sci. (2020) 98:1–9. doi: 10.1093/jas/skaa010.
McCauley SR, Clark SD, Quest BW, Streeter RM, Oxford EM. Review of canine dilated cardiomyopathy in the wake of diet-associated concerns. J Anim Sci. (2020) 98:1–20.
Gizzarelli M, Foglia Manzillo V, Ciuca L, Morgoglione ME, El Houda Ben Fayala N, Cringoli G, et al. Simultaneous detection of parasitic vector borne diseases: a robust cross-sectional survey in hunting, stray and sheep dogs in a mediterranean area. Front Vet Sci. (2019) 6:288.
Hervera M, Castrillo C, Albanell E, Baucells MD. Use of near-infrared spectroscopy to predict energy content of commercial dog food. J Anim Sci. (2012) 90:4401-7.
Goi A, Manuelian CL, Currò S, Marchi M. Prediction of mineral composition in commercial extruded dry dog food by near-infrared reflectance spectroscopy animals. Animals (Basel). (2019) 9:640.
Lee SC, Prosky L. International survey on dietary fiber definition, analysis and references materials. J AOAC Int. (1995) 79:22-36.
Prosky L, Asp GN, Scheweizer TF, de Vries JW, Fuurda I. Determination of insoluble, soluble, and total dietary fiber in foods and food products: interlaboratory study. J of AOAC. (1988) 71:1017-23.
Spitze AR, Wong DL, Rogers QR, Fascetti AJ. Taurine concentrations in animal feed ingredients; cooking influences taurine content. J Anim Physiol Anim Nutr. (2003) 87:251–62.
McMahon GP, O’Kennedy R, Kelly MT. High-performance liquid chromatographic determination of taurine in human plasma using precolumn extraction and derivatization. J Pharm Biomed Anal. (1996) 14:1287-94.
FEDIAF. Nutritional Guidelines for Complete and Complementary Pet Foods for Dogs and Cats. Bruxelles: European Pet Food Industry Federation (2020).
Debraekeleer J, Gross KL, Zicker SC. Feeding young adult dogs: before middle age. In: Small Clinical Nutrition. 5th ed. Topeka, KS (2010). pp. 257-72.
Hendriks WH, Bakker EJ, Bosch G. Protein and amino acid bioavailability estimates for canine foods. J Anim Sci. (2015) 93:4788-95.
Brown WY, Vanselow BA, Redman AJ, Pluske JR. An experimental meat-free diet maintained haematological characteristics in sprint-racing sled dogs. Br J Nutr. (2009) 102:1318–23.
Anturaniemi J, Zaldívar-López S, Moore R, Kosola M, Sankari S, BarrouinMelo SM. The effect of a raw vs dry diet on serum biochemical, hematologic, blood iron, B12, and folate levels in Staffordshire Bull Terriers. Vet Clin Pathol. (2020) 49:258–69.
Ober J, Gillette RL, Angle TC, Haney P, Fletcher DJ, Wakshlag JJ. The effects of varying concentrations of dietary protein and fat on blood gas, hematologic serum chemistry, and body temperature before and after exercise in Labrador Retrievers. Front Vet Sci. (2016) 3:59. Ссылка (accessed January 26, 2021).